单克隆抗体制备过程中，与骨髓瘤细胞融合的是浆细胞吗？

 

来源公众号：东雅生物工作室　作者：小乜老师 

在单克隆抗体制备过程中，与骨髓瘤细胞融合的是被抗原刺激后处于增殖期的B淋巴细胞，而非浆细胞。

1. 细胞选择的理论依据

（1）B淋巴细胞的分化阶段：

免疫动物（如小鼠）后，B淋巴细胞会经历从成熟B细胞→活化B细胞→浆细胞的分化过程。其中，活化B细胞在抗原刺激后处于增殖阶段（免疫后约3天），此时既能产生特定抗体，又保留一定的增殖能力，是融合的理想对象 。

（2）浆细胞虽能分泌大量抗体，但已终末分化，失去增殖能力，无法与骨髓瘤细胞形成稳定杂交瘤 。

2. 实验操作的关键步骤

（1）免疫与细胞提取：

抗原注射后，脾脏中会富集大量活化的B淋巴细胞（尚未完全分化为浆细胞）。这些细胞表面带有抗原特异性受体，能识别并分泌对应抗体 。

（2）融合前的筛选：

通过抗原固定化技术“钓取”B淋巴细胞，而浆细胞因失去表面受体无法被筛选保留。

3. 融合效率的实践验证

（1）浆细胞的局限性：

若直接使用浆细胞，其分裂能力极弱，即使与骨髓瘤细胞融合，也无法长期增殖并稳定分泌抗体 。

（2）活化B细胞的优势：

处于增殖期的B细胞（活化B细胞）与骨髓瘤细胞融合后，能形成既分泌抗体又无限增殖的杂交瘤细胞，并通过筛选（如HAT培养基）保留目标克隆。

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