来源公众号:唐果生物 作者:蒋立锋
2025年北京卷14题
14.动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时,调控pH的CO₂耗尽,培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是
A.必需氨基酸 B.抗生素 C.酸碱指示剂 D.血清
据说约50%考生选D,今天新课也上到这里,上课时也专门问了这个问题,学生首先的反应是一愣,确实没在意颜色为何是粉红,以为是好看😄,约有30%回答是加了血清,这些学生忽略了血清近乎无色。也有三分之一关注到了我讲课时提及的培养液pH是弱碱性,反应过来是酸碱指示。就专门整理了本节几个常见的问题:
1 人造皮肤在烧伤治疗中的主要作用 ?
提供临时覆盖:保护烧伤创面,防止细菌感染、水分流失和外界刺激,减少并发症风险。
促进伤口愈合:为新生皮肤细胞提供生长支架,引导细胞迁移、增殖和分化,加速创面修复,减少瘢痕形成。
缓解疼痛:覆盖创面可减轻疼痛和不适,改善患者生活质量。

2 为何需要5% CO₂气体 ?
维持pH稳定:培养基中通常含碳酸氢盐(NaHCO₃)缓冲体系,CO₂与H₂O反应生成H₂CO₃,进而解离为H⁺和HCO₃⁻,维持培养基pH在7.2-7.4的适宜范围,确保细胞正常代谢和生长。
模拟体内环境:人体血液中CO₂分压约40mmHg,对应大气中约5% CO₂浓度,5% CO₂能较好模拟细胞在体内的气体环境,尤其对贴壁性强、依赖稳定pH的哺乳动物细胞至关重要。

3 为何用胰蛋白酶解离组织细胞 ?
分解细胞间质蛋白:组织细胞间通过蛋白质(如胶原蛋白、纤连蛋白等)连接,胰蛋白酶可特异性水解这些蛋白质,使细胞分离成单个细胞,便于细胞与培养液充分接触,保证营养供应和代谢物排出。
适应培养条件:胰蛋白酶在动物细胞培养的适宜pH(7.2-7.4)下活性较高,而胃蛋白酶在此pH下无活性,因此胰蛋白酶是动物细胞培养中常用的解离酶。

4 机械法分离组织细胞的方法 ?
剪碎组织:用无菌剪刀或镊子将动物组织剪成小碎片,增加细胞暴露面积。
研磨或挤压:将剪碎的组织放入无菌容器中,加入适量培养液,用研磨棒或挤压工具反复研磨或挤压,使细胞从组织中分离出来。
过滤或离心:通过无菌滤网过滤掉未分离的组织碎片,或通过离心机离心,收集沉淀的细胞,制成细胞悬液。

5培养液为何是粉色 ?
酚红指示剂作用:大多数动物细胞培养液中添加了酚红作为pH指示剂。在正常pH范围(7.2-7.4)内,酚红呈橙红色;当pH偏碱(>7.6)时,颜色变为粉红至紫色;pH偏酸(<6.8)时,颜色变为黄色。因此,正常培养液呈粉色或橙红色,是培养基pH正常、细胞生长良好的视觉信号。




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