单克隆抗体制备的29个为什么

 

来源公众号：格物致知站　作者：意在沛

29个为什么

1. 什么是抗体？其化学本质和特点是？

机体产生的专门应对抗原的蛋白质，称为抗体。

抗体能和抗原发生特异性结合。

2. 抗体如何产生？

B细胞活化后增殖分化形成浆细胞，浆细胞分泌抗体。

3.抗体分布在哪里？

①血清；②组织液；③外分泌液（如：乳汁）

4. 传统制备抗体的方法流程是什么？

5. 传统制备抗体的缺点是什么？

①特异性差；②产量低；③纯度低

6. 为什么要给小鼠注射特定的抗原蛋白？

用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。

7. 能一次性给小鼠注射大量特定的抗原蛋白吗？该如何注射？

不能。应该少量多次进行注射。

8. 为什么不直接使用浆细胞进行细胞融合？

浆细胞是高度分化细胞，虽能高效分泌抗体，但‌失去增殖能力‌，体外培养中会迅速凋亡，无法长期存活。

9.给小鼠注射特定的抗原后获得的B淋巴细胞是原始状态的B细胞还是活化的B细胞？

活化的B细胞。

10.此时获取的B淋巴细胞种类单一吗？为什么？

不单一，存在多种B淋巴细胞。因为，同一抗原可能存在多种“抗原表位”。

11.要让细胞具备无限增殖特性，应该选择什么细胞？

癌细胞。

12.为什么不选择其他的癌细胞如肺癌细胞，而选择骨骼瘤细胞？

骨髓瘤细胞是（癌变后的浆细胞）与B细胞具有同源性。

13.B淋巴细胞与骨骼瘤细胞的融合常用的方法有哪些？

电融合法、PEG融合法和灭活病毒诱导法。

14.动物细胞融合与植物原生质体融合的方法相比较，特有的方法是什么？

灭活病毒诱导法。

15.动物细胞融合实质及完成的标志是什么？

两个动物细胞核融合。

16.只考虑两个细胞融合的话，会有几种细胞融合方式？

3种。

17.B淋巴细胞与骨骼瘤细胞融合的原理是什么？

细胞膜具有流动性。

18.杂交瘤细胞是指哪些细胞？

指B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞。

19. 对杂交瘤细胞进行克隆化培养的培养基从物理性质分属于什么培养基？

液体培养基。

20.对杂交瘤细胞进行克隆化培养时，会出现接触抑制现象吗？

不会。

21.杂交瘤细胞克隆化培养的原理是什么？

细胞增殖。

22.杂交瘤细胞是如何筛选出来的？

用特定的选择培养基，如HAT培养基筛选。

23.杂交瘤细胞有什么特点？

既能迅速大量增殖，又能产生抗体。

24.是否所有的杂交瘤细胞都能产生针对某一特定抗原表位的所需抗体？

不是，因为最初有多种B淋巴细胞。

25.整个单克隆抗体制备过程有几次筛选？目的分别是什么？

有2次筛选。第一次：筛选出杂交瘤细胞；第二次：筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。

26.如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？

①进行体外培养，从细胞培养液中获取大量的单克隆抗体；②注射到小鼠腹腔中，从小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体

27.单克隆抗体的含义是什么？

单（一个B淋巴细胞），克隆（克隆化培养获得细胞群），抗体（产生的一种抗体）

28.单克隆抗体有什么特点？

能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，可以大量制备。

29.单克隆抗体有哪些应用？

①诊断鉴定，如：早早孕诊断试剂盒；②运载药物，如：抗体-药物偶联物（ADC）；③治疗疾病

检 测

1．可一次性向小鼠体内注射大量抗原，以产生大量能产生抗体的B淋巴细胞（×）

2．筛选出的杂交瘤细胞，染色体数目和产生的抗体可能不同（√）

3．注射病原体一段时间后，从小鼠脾中分离得到的不是同一种B淋巴细胞（√）

4．可将杂交瘤细胞注射到小鼠脾脏中，一段时间后提取单克隆抗体（×）

5．杂交瘤细胞体外培养出现接触抑制现象时需先酶解再分瓶培养（×）

6．B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合必须使用灭活病毒诱导（×）

7．用选择培养基筛选出的杂交瘤细胞均能产生所需的特定抗体（×）

8．B淋巴细胞在融合前需要进行原代培养（×）https://wxa.wxs.qq.com/tmpl/pq/base_tmpl.html

9．初次筛选得到的抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即可在体外大规模培养（×）

10．杂交瘤细胞克隆化培养和植物细胞培养的原理是一样的（√）

11．制备单克隆抗体的原理有动物细胞膜的流动性和动物细胞核具有全能性（×）

12．科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出的单克隆抗体可以用于诊断是否感染SARS病毒（√）

13. 小鼠产生的单克隆抗体可以直接用于人体静脉注射以治疗疾病（×）

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